Tipos de pruebas diagnósticas clínicas para G6PD

Pruebas cuantitativas de G6PD

Pruebas cuantitativas

Hasta hace poco, las pruebas cuantitativas eran complejos análisis de laboratorio que necesitaban contar con una buena infraestructura. En los últimos años se ha observado la aparición de pruebas cuantitativas que pueden utilizarse en el lugar donde se presta asistencia médica en los países donde la malaria es endémica.4 Sin embargo estas pruebas todavía tienen pendiente recibir la precalificación de la OMS.5

Análisis espectrofotométrico

  • La espectrofotometría mide la actividad de G6PD mediante la medición de la formación de NADPH según la diferencia en la absorción de la muestra a 340 nm con el paso del tiempo. Este análisis se utiliza en los laboratorios de hospital.
  • Normalmente los laboratorios que llevan a cabo este análisis ofrecen un valor de actividad de G6PD cuantitativo y un intervalo normal. Si el valor entra dentro del intervalo, el paciente presenta una actividad de G6PD normal y se le puede recetar tafenoquina o primaquina.
  • El análisis espectrofotométrico es el tratamiento de referencia para medir la actividad enzimática de G6PD en los eritrocitos, proporcionando una media ponderada de la actividad de las células con déficit de G6PD y las células con G6PD normal en cualquier muestra. Por tanto, se utiliza como una prueba de referencia que permite evaluar el funcionamiento de las nuevas pruebas de diagnóstico inmediato (tanto cuantitativas como cualitativas).
  • Tenga en cuenta que los resultados se ven afectados por la concentración de hemoglobina en la muestra de sangre, en pacientes anémicos o aquellos con deficiencia de hierro los valores de G6PD serán erróneamente altos.

Pruebas cuantitativas de diagnóstico inmediato del déficit de G6PD

En los últimos años se ha observado la aparición de pruebas de diagnóstico inmediato para el déficit de G6PD y se prevé que también se dispondrá de otros productos nuevos.1 Actualmente existen dos productos en el mercado:

Prueba de G6PD ESTÁNDAR (SD Biosensor)

  • Mide la actividad de G6PD y la hemoglobina y ofrece un valor de G6PD normalizado para la concentración de hemoglobina (U/g Hb).
  • Esta prueba se ha diseñado para su uso en el lugar donde se presta la asistencia médica y es de escasa complejidad.

G6PD Biosensor (AccessBio)

  • Mide la actividad de G6PD y necesita un dispositivo independiente para medir la hemoglobina.
  • Esta prueba se ha diseñado para su uso en el lugar donde se presta la asistencia médica y es de escasa complejidad.

Profesional de la salud usando un microscopio

Pruebas de G6PD cualitativas

Las pruebas cualitativas ofrecen una lectura deficiente/normal para el déficit de G6PD. Sin embargo, en cada prueba, se debe ser cauteloso a la hora de comprender lo que significa «deficiente» y «normal». Las pruebas actualmente disponibles no pueden identificar de forma fiable a las mujeres heterocigóticas con actividad de G6PD ≥30% de lo normal.

La sensibilidad de la prueba varía según la actividad de G6PD. Por tanto, una prueba puede identificar con precisión un hombre hemicigótico para el gen de G6PD con una actividad G6PD <30 % de lo normal como «deficiente de G6DP», mientras que una mujer heterocigótica con actividad enzimática de G6PD de un 50 % de lo normal podría identificarse como con «G6PD normal», cuando esa persona podría en realidad correr riesgo de hemólisis grave por un tratamiento con 8-aminoquinolina.

Prueba de mancha fluorescente

  • La prueba de mancha fluorescente (FST) se basa en la fluorescencia natural de la NADPH (nicotinamida adenina dinucleótico fosfato) bajo luz ultravioleta. G6PD produce NADPH, por eso las muestras con G6PD normal generan una mancha en verde fluorescente vivo, mientras que las muestras con déficit de G6PD no lo hacen.1
  • La prueba es sencilla y económica, y es resistente para su uso en distintos entornos con resultados en 30 minutos. Sin embargo, se necesita una cadena de frío para los reactivos, electricidad y formación para interpretar los resultados.

Pruebas de diagnóstico rápido (PDR) de flujo lateral

  • Se han realizado pruebas cualitativas en la misma plataforma diagnóstica que las pruebas de diagnóstico rápido de la malaria. Operativamente estas pruebas resultan muy adecuadas para el abordaje de los casos de malaria y existen recursos para formar a los profesionales de la salud.2
  • Se dispone de dos pruebas (Binax Now® G6PD y Carestart G6PD™). Ambas son fáciles de usar con resultados en 15 minutos. Binax Now® no puede usarse a más de 25 °C, así que no resulta adecuada para las zonas endémicas de P. vivax. Carestart G6PD™ es apta para su uso a temperaturas de entre 18 y 32 °C.
  • Estas dos pruebas pueden identificar con fiabilidad las muestras con déficit de G6PD con actividades enzimáticas <30 % de lo normal.3
  • Las limitaciones de estas pruebas son las siguientes: no tienen líneas de control y no pueden ajustarse a temperaturas superiores a los 25-32 ºC.